Nikon TIRF 模組

Nikon TIRF 模組利用光學全反射原理產生之漸逝波(Evanescent Wave),來激發貼近蓋玻片表 100nm 以內的螢光物質。
物理現象
光線從折射率高介質穿過折射率相對低介質,當入射角度大於臨界值時,會產生完全反射回折射率高介質的現象;此時玻片表面產生漸逝波,離得愈遠,能量遞減愈快,所以只有在 100nm 內的螢光可被激發,有效降低非對焦面的背景訊號,進而得到戲劇性的高訊譟比影像。


特製物鏡
Plan Apo TIRF 60x 與 Plan Apo TIRF 100x 物鏡,具有超高解析度 N.A. 1.49,並可手動調整溫度校正環,避免鏡油因溫度變化折射率改變所產生的球面像差;其中,100x 物鏡更適合建構雷射光鉗系統(Laser Tweezers System)。


細胞結構觀察
(a)傳統螢光影像
(b)TIRF影像
(c)兩種影像套色疊加

單分子觀察
(a)傳統螢光影像,可觀察細胞邊界
(b)TIRF影像,可動態追蹤單分子
Specimen: YFP-tagged neurotransimitter receptors expressed in dispersed hippocampal neurons in primary culture

